生(shēng)物芯片制(zhì)備方法描述
更新時(shí)間(jiān):2021-04-15 點擊次數(shù):1237
生(shēng)物芯片制(zhì)備方法描述
生(shēng)物芯片,又稱蛋白芯片或基因芯片,該技(jì)術(shù)系指将大(dà)量探針分子固定于支持物上(shàng)後與帶熒光标記的DNA或其他樣品分子(例如蛋白,因子或小(xiǎo)分子)進行(xíng)雜交,通(tōng)過檢測每個(gè)探針分子的雜交信号強度進而獲取樣品分子的數(shù)量和(hé)序列信息。
包括原位合成和(hé)預合成後點樣。
原位合成:适用于寡核苷酸,通(tōng)過光引導蝕刻技(jì)術(shù)。已有(yǒu)P53、P450,BRCAI/BRCA2 等基因**的基因芯片。
預合成後點樣:是将提取或合成好的多(duō)肽、蛋白、寡核苷酸、cDNA、基因組DAN等通(tōng)過特定的高(gāo)速點樣機器(qì)人(rén)直接點在芯片上(shàng)。該技(jì)術(shù)優點在于相對簡易低(dī)*,被國內(nèi)外廣泛使用。
接觸式點樣:是指打印針從多(duō)孔闆取出樣品後直接打印在芯片上(shàng)。打印時(shí)針頭與芯片接觸。優點是探針密度高(gāo),通(tōng)常一平方厘米可(kě)打印2500個(gè)探針。缺點是定量準确性及重現性不太好。
非接觸式點樣:針頭與芯片保持一定距離。優點是定量準确重現性好,缺點是噴印的斑點大(dà),密度低(dī)。通(tōng)常一平方厘米隻有(yǒu)400點。但(dàn)是**公司能把噴印點直徑大(dà)小(xiǎo)由150-100μm降到30-25μm。可(kě)将哺乳動物整個(gè)基因組DNA點陣于一張芯片上(shàng)成為(wèi)可(kě)能。